荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶抗血清的制备及抗体效价检测

编号 zgly0000886816

文献类型 期刊论文

文献题名 荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶抗血清的制备及抗体效价检测

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 陆雪莹  李洁琼  庄淑珍  刘小宁  马纪 

作者单位 新疆大学生命科学与技术学院  新疆生物资源基因工程重点实验室 

母体文献 四川动物 

年卷期 2014(5)

页码 659-664

年份 2014 

关键词 小胸鳖甲  几丁质酶  DNA-蛋白质联合免疫  抗血清  抗体效价 

文摘内容 目的几丁质酶是昆虫重要的防御物质,本研究采用DNA-蛋白质联合免疫策略制备荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶(MpCHI786)的抗血清,用于检测小胸鳖甲在外界不良条件下几丁质酶的变化。方法从小胸鳖甲成虫中提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增Mpchi786 cDNA,构建原核表达载体pET30a-Mpchi786,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达获得融合蛋白His-MpCHI786。对融合蛋白切胶纯化后与弗氏佐剂混合作为抗原。另外,构建真核表达质粒pcDNA3.0-Mpchi786,对小鼠尾静脉高压注射,8 h后RT-PCR检测其在肝脏的瞬时表达。