小反刍兽疫病毒H蛋白原核表达的研究

编号 zgly0001362849

文献类型 期刊论文

文献题名 小反刍兽疫病毒H蛋白原核表达的研究

作者 赵文华  杨仕标  宋建领  李华春  张念祖 

作者单位 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室  云南省畜牧兽医科学院 

母体文献 中国动物保健 

年卷期 2009年07期

年份 2009 

分类号 S852.65 

关键词 小反刍兽疫病毒  开放性读码框  H基因  H蛋白  原核表达 

文摘内容 小反刍兽疫病毒属副粘病毒科麻疹病毒属,为一不分节段的负链RNA病毒。本研究以灭活的检测用抗原为材料,抽提基因组RNA作为模板,根据Gen Bank下载的序列及载体的需要设计其主要的抗原基因H基因的编码序列的RT-PCR扩增引物;然后将扩增基因片段与T载体连接克隆测序,再与原核表达载体pET100/D-TOPO连接、诱导表达。结果显示所设计引物对模板有预期扩增,序列测定表明为正确片段;片段经纯化与表达载体连接,已挑到阳性克隆。H基因的表达菌经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳,结果显示:H基因有预期分子量大小的蛋白表达;用Anti-His抗体已检测到相应融合蛋白的表达,其原核表达的相应蛋白抗原性状况正在试验研究中,表达产物具有潜在的诊断抗原和免疫原价值。