核盘菌EPSP合酶基因在大肠杆菌中的表达

编号 zgly0000483073

文献类型 期刊论文

文献题名 核盘菌EPSP合酶基因在大肠杆菌中的表达

作者 于寒颖  杨谦 

作者单位 哈尔滨工业大学生命科学与工程系  大庆石油学院石油工程系 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2006,28(6)

页码 103-108

年份 2006 

分类号 Q781 

关键词 基因表达  核盘菌  arom基因  大肠杆菌 

文摘内容 不含有内含子的核盘菌arom基因已经被扩增、测序。该基因编码五功能的AROM蛋白。为了大量获得核盘菌AROM蛋白的结构域之-5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS), 将该菌arom基因编码脱氢奎尼酸合酶(DHQS)和EPSPS两结构域的DNA序列和只编码EPSPS结构域的DNA序列分别克隆人载体pGEX-4t-2和载体pET28b中, 构建了4个表达载体pGEX—DE、pGEX-E、pET-DE和pET-E, 并将其转人大肠杆菌DH5a、大肠杆菌B121(DE3)或大肠杆菌JM109中表达。酶活测定和SDS—PAGE分析结果显示, 上述编码序列在大肠杆菌细胞内获得了表达, 含有表达载体pGEX—E、pET-DE和pET-E的大肠杆菌B1221(DE3)转化子具有EPSPS的催化活性, 说明核盘菌arom基因的这些DNA片段可以被单独表达。核盘菌EPSPS异源表达系统的建立为该酶的抑制剂设计奠定了基础。