红松SSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000721065

文献类型 期刊论文

文献题名 红松SSR-PCR反应体系的建立与优化

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 冯富娟  赵丹  孙晓艳  韩士杰  许小妍 

作者单位 东北林业大学生命科学学院  东北林业大学林学院 

母体文献 经济林研究 

年卷期 2010,28(1)

页码 35-40

年份 2010 

分类号 Q75 S791.247 

关键词 红松  SSR  优化  正交设计  单因子试验 

文摘内容 为了建立红松SSR-PCR最佳反应体系,以CTAB法提取的红松针叶DNA为模板,应用单因子试验及L16(45)正交试验系统分析了DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶浓度等对SSR-PCR扩增结果的影响,并对延伸时间、热循环参数进行了探讨,建立了稳定的、可重复的红松SSR-PCR最佳反应体系及PCR扩增参数。结果表明,PCR的最佳反应体系为: 10μL体系中,1×PCRbuffer1μL、DNA模板50～120ng,Mg2+3mmol/L,dNTP0.4mmol/L,引物0.5μmol/L,Taq酶0.75U。利用该体系筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物13对。在此反应体系下,所扩增谱带清晰、稳定、多态性高。