苹果多酚氧化酶双链RNA干扰(RNAi)研究

编号 zgly0000345072

文献类型 期刊论文

文献题名 苹果多酚氧化酶双链RNA干扰(RNAi)研究

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 曹艳红  章镇  姚泉洪  彭日荷  熊爱生  李贤 

作者单位 南京农业大学  南京农业大学  上海市农业科学院生物技术研究中心 

母体文献 实验生物学报 

年卷期 2004,37(6)

页码 487-493

年份 2004 

分类号 Q943  S661.1 

关键词 转基因苹果  多酚氧化酶  抗性  根癌农杆菌介导  栽培品种  红富士  果实  苹果多酚  双链RNA  基因片段 

文摘内容 以成熟苹果果实的RNA为模板, 经RT—PCR扩增并克隆苹果多酚氧化酶(APPO)长度为710bp的反义、正义基因片段。以副球菌中类胡罗卜素合成有关的(crtW+crtY)融合基因片段YYT为间隔区。将APPO反义基因片段、YYT和APPO正义基因片段串联, 构成全长为2446bp的DNA并插入到植物双元载体pYPX145中, 构成可表达苹果多酚氧化酶双链RNA的植物双元载体pYF7704。以根癌农杆菌介导的叶盘转化法转化苹果栽培品种红富士, 通过50mg/L卡那霉素筛选和GUS检测, 获得了转基因苹果抗性芽。荧光定量RT—PCR检测结果显示, 转基因苹果抗性芽内多酚氧化酶基因的干扰效果达91.69%以上, 研究结果证实多酚氧化酶双链RNA干扰在转基因苹果上是可行的。