流行性腹泻病毒M基因与甲病毒载体重组RNA的构建

编号 zgly0001299894

文献类型 期刊论文

文献题名 流行性腹泻病毒M基因与甲病毒载体重组RNA的构建

作者 余丽芸  侯喜林 

作者单位 黑龙江八一农垦大学生命科技学院  黑龙江八一农垦大学动物科技学院 黑龙江大庆163319  黑龙江大庆163319 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2005年05期

年份 2005 

分类号 S852.65 

关键词 猪流行性腹泻病毒  M基因  甲病毒载体  重组RNA 

文摘内容 将猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因导入甲病毒载体(plasmid Semliki ForestViru,pSFV) ,研究该基因及其编码蛋白的表达。首先将扩增的病毒M 基因导入pSFV的SP6 启动子下游。用Spe Ⅰ酶将pSFV M重组质粒DNA 线性化,再将其体外转录成5′末端含帽子结构的重组RNA。然后通过电穿孔法将此重组RNA转染BHK 21 细胞,收集病毒样粒子用于感染BHK 21 细胞。采用细胞免疫化学的方法对转染和感染细胞的表达产物进行分析。pSFV M RNA 转染和病毒粒子感染哺乳动物细胞表达的M 蛋白,可与PEDV多克隆抗体起特异反应,证明体外转录的重组RNA 含有PEDV M的特异序列。