桉树ISSR-PCR反应体系的建立及优化

编号 zgly0000590402

文献类型 期刊论文

文献题名 桉树ISSR-PCR反应体系的建立及优化

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 曾艳玲  谢鹏  谢耀坚  谭晓风 

作者单位 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室  国家林业局桉树研究开发中心 

母体文献 中南林业科技大学学报：自然科学版 

年卷期 2008,28(1)

页码 44-48

年份 2008 

分类号 S792.39  Q291 

关键词 分子生物学  桉树  叶片基因组DNA  ISSR-PCR  优化 

文摘内容 模板DNA、引物、dNTPs、Mg^2＋的浓度,Taq DNA聚合酶的用量以及退火温度是影响简单序列重复区间扩增(ISSR-PCR)结果的主要因素.以桉树叶片基因组DNA为试材,系统地测试了这6个因素对桉树ISSR反应结果的影响.结果表明：最优化的反应体系即20μL反应体系中,含20 ng模板DNA、0.4μmol.L^-1随机引物、0.15 mmol.L^-1dNTPs、2.0 mmol.L^-1Mg^2＋、1.25 U TaqDNA聚合酶.最佳退火温度为55℃;PCR反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性45 s,55℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃再延伸7 min。