萱草属植物ISSR-PCR反应体系的优化

编号 zgly0001317995

文献类型 期刊论文

文献题名 萱草属植物ISSR-PCR反应体系的优化

作者 朱云华  朱生树  苏倩  施季森 

作者单位 国家林业局林木遗传与基因工程重点实验室(南京林业大学)  南京中山陵园管理局  国家林业局林木遗传与基因工程重点实验室(南京林业大学) 金陵科技学院 

母体文献 林业科技开发 

年卷期 2007年04期

年份 2007 

分类号 S682.19 

关键词 萱草属植物  ISSR-PCR  反应体系  优化 

文摘内容 以萱草属的3种植物为材料,对影响ISSR-PCR扩增效果的因素Taq酶用量、Mg2+浓度、dNTP用量、引物用量、模板DNA浓度以及退火温度等指标进行单因子筛选和优化,建立了适合萱草属植物ISSR-PCR分析的最佳PCR反应体系:20μL反应体系中Taq酶0.6U、Mg2+1.8mmol/L、1×Buffer2μL、dNTP0.2mmol/L、引物0.6mmol/L、DNA模板10ng/μL。扩增程序为94℃预变性5min,94℃变性40s,52℃退火45s,72℃延伸1.50min,共39个循环;72℃完全延伸5min,4℃保持。该反应体系及扩增程序扩增谱带清晰,产物量多,为利用ISSR-PCR分子标记研究萱草属植物的遗传多样性提供标准反应条件。