狗牙根ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001355151

文献类型 期刊论文

文献题名 狗牙根ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 马涛  刘卫东  杨水莲  舒必超  刘瑞峰  谢鹏 

作者单位 中南林业科技大学 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2009年01期

年份 2009 

分类号 S688.4 

关键词 草业科学  狗牙根  ISSR-PCR  反应体系  优化 

文摘内容 以改良的CTAB法提取的狗牙根叶片DNA为模板,采用单因素多水平方法对狗牙根ISSR反应体系进行构建和优化,系统分析Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物和buffer这6种ISSR反应成分的浓度对扩增结果的影响,结果表明:20.0μL PCR反应体积中,20.0 ng模板DNA,0.4μmol/L引物,0.5 mmol/L Mg2+,0.05 mmol/L dNTPs,0.2 U Taq DNA聚合酶,2.0μL 10×buffer.反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,55℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;再72℃延伸7 min,4℃保温.