乌拉尔甘草离体再生与遗传转化技术的研究

编号 zgly0001624433

文献类型 期刊论文

文献题名 乌拉尔甘草离体再生与遗传转化技术的研究

作者 胡海英  张芮  段艳慧  谢应忠 

作者单位 宁夏大学农学院  宁夏大学生命科学学院 

母体文献 草业学报 

年卷期 2016年11期

年份 2016 

分类号 S567.71 

关键词 乌拉尔甘草  茎段  不定芽分化  遗传转化  绿色荧光蛋白 

文摘内容 研究乌拉尔甘草离体再生受体系统和遗传转化技术方法,为甘草基因工程育种提供前期实验基础。以乌拉尔甘草茎段为外植体,试验筛选最适不定芽分化培养基和增殖壮苗培养基;以乌拉尔甘草茎段为受体,利用农杆菌介导法对乌拉尔甘草进行GUS和GFP基因的遗传转化研究。结果表明,以乌拉尔甘草去腋芽茎段为外植体,其不定芽最适分化和增殖培养基配方为MS+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L 6BA+0.1mg/L IBA,不定芽分化率达38.8%,增殖倍数3.67,适宜的壮苗培养基为MS+0.5mg/L NAA。与去腋芽茎段相比,带腋芽茎段的不定芽分化率达100%,能够在含抗生素的选择培养基MS+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L 6BA+0.1mg/L IBA+50mg/L Kan+250mg/L Car上存活,确定为最适转化受体;带腋芽茎段在分化培养基上预培养7d后,经OD600=0.6的菌液侵染10min,共培养3d,在选择培养基上培养20d,其不定芽分化率为43.75%,经GFP荧光检测可得到78.88%的GFP基因瞬时表达率;随机选取5株再生转化植株,经PCR检测,均有GFP和GUS基因的目的条带,GFP基因表达较强烈,初步获得了5个株系的阳性转化植株。