运用基因枪法进行蛹虫草遗传转化的研究

编号 zgly0001493798

文献类型 期刊论文

文献题名 运用基因枪法进行蛹虫草遗传转化的研究

作者 茅文俊  鲍大鹏  周陈力  李燕  谭琦  汪滢 

作者单位 国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2015年09期

年份 2015 

分类号 S567.35 

关键词 蛹虫草  基因枪  遗传转化  绿色荧光蛋白 

文摘内容 采用蛹虫草[Cordyceps militaris(L.)Link]野生型菌株CM01为供试材料,以金粉包裹质粒pDHt-gpd A-GFP-bar,运用基因枪法转化,经草铵膦抗性筛选,最终在靶距离6 cm或9 cm,氦气压力7.58×106 Pa或8.96×106 Pa条件下,获得2个遗传稳定的转化子Gfp2与Gfp3,转化效率为0.4 cfu·μg-1。PCR鉴定与Southern杂交分析显示,草铵膦抗性基因Bar已经以单拷贝或者多拷贝方式整合到蛹虫草转化子的基因组中。蛹虫草转化子的菌丝在荧光显微镜下可以观测到绿色荧光,表明载体携带的绿色荧光蛋白基因在蛹虫草转化子中得到表达。研究结果表明可以把基因枪法应用于真菌蛹虫草,建立了一种简便有效的遗传转化方法,而转化效率需要通过优化基因枪参数设置、受体材料制备等途径进一步提高。