杨树炭疽病菌原生质体遗传转化的建立及绿色荧光蛋白的表达

编号 zgly0000817562

文献类型 期刊论文

文献题名 杨树炭疽病菌原生质体遗传转化的建立及绿色荧光蛋白的表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 李思蒙  王永林  黄冬辉  田呈明 

作者单位 北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室 

母体文献 林业科学 

年卷期 2013(5)

页码 121-127

年份 2013 

分类号 S763.11 

关键词 杨树  炭疽菌  遗传转化  原生质体  绿色荧光蛋白 

文摘内容 以杨树炭疽病菌菌株C1-5-2作为受体,通过PEG介导的原生质体转化法,将含有潮霉素B(hph)和GFP表达基因的质粒gGFP转入杨树炭疽病菌菌丝的原生质体中。幼嫩菌丝在0.7mol·L-1NaCl溶解的1% Lysing enzyme酶解液的作用下酶解210min可以得到108·mL-1的原生质体;在PEG介导下,通过含有潮霉素浓度为300μg·mL-1的PDA选择培养基筛选转化子,每微克DNA获得41个转化子的平均转化效率。对转化子进行PCR鉴定表明: hph基因和GFP基因已经整合到杨树炭疽病菌转化子基因组中,通过荧光显微镜观察到转化子可以发出清晰的绿色荧光,且转化子的潮霉素抗性和GFP表达性状可以稳定遗传。