牛副流感病毒3型抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

编号 zgly0001516956

文献类型 期刊论文

文献题名 牛副流感病毒3型抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

作者 杨建乐  赵贵民  侯佩莉  王洪梅  李杰  何洪彬 

作者单位 东北农业大学生命科学学院  山东省农业科学院奶牛研究中心 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2016年11期

年份 2016 

分类号 S852.653 

关键词 牛副流感病毒3型  NP-HN基因  原核表达  酶联免疫吸附试验  抗体检测 

文摘内容 旨在建立牛副流感病毒3型(BPIV3)抗体间接ELISA检测方法。克隆NP-HN截短串联基因并构建原核表达载体pET28a(+)-NP-HN,诱导纯化NP-HN重组蛋白作为包被抗原,优化ELISA反应条件,建立BPIV3抗体间接ELISA检测方法,进一步与病毒中和试验和进口ELISA试剂盒进行比较,应用本方法对270份临床血清样本进行了检测。结果表明,表达的NP-HN重组蛋白大小为44ku,具有良好的反应原性,建立的ELISA检测方法特异性强,与牛的主要呼吸道病原如牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数小于8%,与病毒中和试验和进口商品化ELISA试剂盒的总符合率分别为96.67%和98.89%。对采自山东、辽宁和天津的270份临床血清样本检测后总的阳性率为82.59%(223/270)。建立的BPIV3抗体间接ELISA方法具有较好的特异性和敏感性,可应用于BPIV3的流行病学调查和抗体检测研究。