ORFV-Yulin株的分离鉴定及其B2L基因在昆虫杆状病毒系统中的表达

编号 zgly0001548687

文献类型 期刊论文

文献题名 ORFV-Yulin株的分离鉴定及其B2L基因在昆虫杆状病毒系统中的表达

作者 冯平  李云章  孙丰廷  屈雷  闫海龙 

作者单位 内蒙古农业大学兽医学院  榆林学院生命科学学院  武汉中拓康明生物科技有限公司 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2017年09期

年份 2017 

分类号 S852.654 

关键词 羊口疮病毒  B2L基因  昆虫杆状病毒表达系统 

文摘内容 【目的】从榆林市具有典型羊口疮症状的陕北白绒山羊唇结痂病料中分离羊口疮病毒(Orf virus,ORFV),克隆分析其B2L基因序列,并通过昆虫杆状病毒表达B2L基因。【方法】利用牛肾传代细胞进行ORFV的分离培养,通过PCR的方法从分离到的病毒中扩增出B2L全长基因,测序后进行序列及遗传进化分析。利用扩增所得的B2L基因构建昆虫杆状病毒表达载体,包装出杆状病毒后侵染sf9细胞,并通过SDS-PAGE、Western-blot以及质谱鉴定等方法验证目的基因的表达情况。【结果】成功分离出1株羊口疮病毒,命名为ORFV-Yulin株;扩增的B2L全长基因长度为1 137bp,与Hub13和GY-AHF10株亲缘关系最近,核苷酸序列和氨基酸序列的相似性分别为99%和99.2%。通过昆虫杆状病毒表达系统成功表达了B2L基因,获得了47ku的重组蛋白。【结论】从榆林市陕北白绒山羊中获得了羊口疮病毒分离株(ORFV-Yulin);通过昆虫杆状病毒表达系统成功表达了ORFV-Yulin株的B2L基因。