采用环介导等温扩增法(LAMP)快速检测苹果根结线虫

编号 zgly0001526572

文献类型 期刊论文

文献题名 采用环介导等温扩增法(LAMP)快速检测苹果根结线虫

作者 魏洪岩  王暄  李红梅  孙文荣  顾建锋 

作者单位 南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室  宁波出入境检验检疫局 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 S432.45 

关键词 苹果根结线虫  环介导等温扩增  优化  特异性  灵敏度 

文摘内容 为高效、简便、快速地对我国进境植物检疫性有害生物名录中的非中国种—苹果根结线虫Meloidogyne mali进行检疫,通过比较Gen Bank中根结线虫相关序列,以苹果根结线虫28S r DNA非保守区域序列设计环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）的特异性引物,并优化反应条件,建立一种可快速检测苹果根结线虫的LAMP检测体系。结果显示:d NTPs浓度为0.4 mmol/L、Mg2+浓度为5.0 mmol/L、不添加甜菜碱、反应时间为60 min时,LAMP检测体系扩增效率最高;用琼脂糖凝胶电泳、SYBR Green I染色和LFD试纸均能检测到苹果根结线虫的扩增产物。所建立的LAMP检测体系能够从10种供试植物线虫种群中特异性地检测出苹果根结线虫,灵敏度为1/20 000条线虫DNA,比常规PCR灵敏度高10倍。表明所建立的苹果根结线虫LAMP快速检测体系可用于我国口岸进境植物中苹果根结线虫检疫。