编号 zgly0001706479
文献类型 期刊论文
文献题名 萱草乙二醛酶基因的克隆及花粉管通道法遗传转化
作者 倪迪安 梁锦 高马也 钟荣 谭雨馨 刘翔 尹冬梅 张志国
作者单位 上海应用技术大学生态技术与工程学院
母体文献 植物生理学报
年卷期 2020年02期
年份 2020
分类号 Q943.2 S682.19
关键词 萱草 乙二醛酶 生物信息学 基因克隆 花粉管通道转基因
文摘内容 植物在逆境条件下会积累过量有毒醛类化合物(如甲基乙二醛),乙二醛酶可有效清除此类化合物以维持体内平衡。为研究萱草乙二醛酶基因的功能,根据萱草转录组测序结果,采用生物信息学方法筛选乙二醛酶候选基因,并通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法首次从萱草中克隆了乙二醛酶的编码序列(coding sequence,CDS)的全长,命名为HfGLXI-1。该CDS全长885 bp,编码295个氨基酸,分子进化树分析显示该基因编码的蛋白质属于乙二醛酶进化枝I (Clade I),即具有乙二醛酶活性。蛋白质高级结构预测显示HfGLXI-1主要由无规则卷曲、α螺旋和延伸链组成,其配体为二价钴离子和谷胱甘肽,与乙二醛酶的性质相符。通过PCR扩增结果显示扩增得到的基因组DNA条带大小与该基因CDS的分子量相近,测序结果表明上述两者序列完全一致,推测HfGLXI-1基因不存在内含子。通过构建含有HfGLXI-1 cDNA的过表达载体及采用花粉管通道方法进行转化,获得表达转基因萱草,为进一步研究萱草HFGLXI-1的功能提供参考。