编号
zgly0000450791
文献类型
期刊论文
文献题名
青花菜雄性不育相关基因BoDHAR的克隆与表达分析
作者单位
中国农业科学院蔬菜花卉研究所
西北农林科技大学园艺学院
母体文献
生物工程学报
年卷期
2006,22(5)
页码
751-756
年份
2006
分类号
Q786
关键词
青花菜(Brassica
oleracea
L.
var.
italica
)
DHAR(dehydroascorbate
reductase)
基因克隆
RT-PCR
文摘内容
以一个与甘蓝显性核不育相关的差异表达片段的序列为信息探针, 通过在NCBI与TAIR网站数据库中进行同源EST序列搜索, 经人工拼接、RT-PCR、PCR克隆与序列分析, 获得了青花菜脱氢抗坏血酸还原酶DHAR dehydroascorbate reductase基因的cDNA与DNA全长序列, 命名为BoDHAR。并利用双链接头介导PCR的染色体步行技术(genome walking)克隆了其上游644bp的5′端序列。所获的BoDHAR基因全长1486bp, 存在两个内含子, DNA编码区序列633bp, 编码210个氨基酸; 序列分析表明: BoDHAR与同源基因AT1G19570.1 cDNA序列有82.3%的一致性, 推导的氨基酸序列有79.6%的一致性; 编码的水溶性蛋白存在多个磷酸化位点; 5′端上游区存在明显的转录调控序列。半定量RT-PCR结果表明: BoDHAR在可育系花蕾中的表达量明显高于不育系花蕾, 在花药中的表达明显高于其它部位。