棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ基因和启动子克隆与分析

编号 zgly0000649822

文献类型 期刊论文

文献题名 棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ基因和启动子克隆与分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 庞漫宇  郭丽琼  项凡  林俊芳 

作者单位 华南农业大学食品学院生物工程系  华南农业大学生物质能研究所 

母体文献 生物技术 

年卷期 2010,20(6)

页码 15-18

年份 2010 

分类号 S188 

关键词 棘孢木霉  木聚糖酶Ⅰ  基因克隆  启动子 

文摘内容 目的: 克隆及分析棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ结构基因和上游调控区,以获得内源启动子。方法: 根据木霉属木聚糖酶Ⅰ结构基因及上游调控区的保守性,以棘孢木霉基因组DNA为模板,进行简并PCR扩增。产物纯化并克隆至T载体,经酶切鉴定后进行序列分析。结果: 扩增获得1.2 kb的片段,酶切鉴定及序列分析表明,该片段长1 265 bp,由753 bp的木聚糖酶Ⅰ结构基因和512 bp的上游调控区组成。结构基因编码230个氨基酸,具有糖基水解酶第11家族的典型保守区域。上游调控区具备核心启动子和转录起始点,有CAAT-Box、TATA-Box等启动子特征元件,分析其还有CreⅠ、XlnR、Ace1、AreA等多个转录因子结合位点。结论: 克隆的512 bp上游调控区是典型的丝状真菌基因启动子,可作为内源启动子用于构建棘孢木霉高效外源基因表达系统。