小熊猫IL-17的克隆及原核表达

编号 zgly0001469591

文献类型 期刊论文

文献题名 小熊猫IL-17的克隆及原核表达

作者 赵玄多  徐素慧  杨雯昱  高洋  修云芳  陈玉村  陈德坤 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  海峡(福州)大熊猫研究交流中心 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 Q78 

关键词 小熊猫  白介素17  基因克隆  原核表达  纯化 

文摘内容 为制备小熊猫白介素17(IL-17)表达产物,提取活化的小熊猫外周血单个核细胞总RNA,合成cDNA,以此为模板克隆IL-17的成熟肽编码序列,将其重组到原核表达载体pET-32a,并将其转入到BL-21(DE3)中,进行序列分析。重组载体经IPTG诱导表达,表达产物经镍柱纯化。结果显示,小熊猫IL-17的CDS区由462bp组成,含23个氨基酸组成的信号肽,重组IL-17由130个氨基酸组成。SDS-PAGE显示,原核表达产物在诱导温度25℃,IPTG浓度0.5mmol/L,诱导时间20h的条件下,能够获得最佳表达。