犬β-防御素cBD103的原核表达和纯化

编号 zgly0001541623

文献类型 期刊论文

文献题名 犬β-防御素cBD103的原核表达和纯化

作者 朱骞  包银莉  秦海斌  宋珍华  贺星亮  温海  高一龙 

作者单位 公安部南京警犬研究所警犬技术公安部重点实验室  南京农业大学动物医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2017年05期

年份 2017 

分类号 S852.42 

关键词 犬β-防御素103  原核表达  纯化 

文摘内容 将犬β-防御素103(canineβ-defensin 103,cBD103)基因亚克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-cBD103,转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达后,利用Ni-NTA亲和层析纯化该蛋白,并用肠激酶酶切融合蛋白,SDS-PAGE鉴定表达产物和纯化产物。结果表明,质粒pET-cBD103经PCR及双酶切鉴定证明构建正确,大肠埃希菌中成功表达出目的蛋白,蛋白大小约为24ku,以可溶性表达为主。经过纯化和酶切,得到大小8ku的cBD103,与预期大小一致。该研究在大肠埃希菌中表达了目的蛋白,为下一步大规模制备cBD103奠定了基础。