津田芜菁MYB77蛋白的原核表达及纯化

编号 zgly0000660433

文献类型 期刊论文

文献题名 津田芜菁MYB77蛋白的原核表达及纯化

作者 阎淑滑  周波  李玉花 

作者单位 东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室 

母体文献 生物技术通讯 

年卷期 2010,21(6)

页码 842-845

年份 2010 

分类号 Q78 

关键词 转录因子MYB77  津田芜菁  融合蛋白  原核表达  纯化 

文摘内容 目的: 建立津田芜菁转录因子MYB77的原核表达系统,并在大肠杆菌中获得表达。方法: RT-PCR获得MYB77的编码序列,将其克隆至pGEM-T载体中,在上下游引物中分别引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,PCR获得带酶切位点的目的片段并将其连接到重组表达载体pGEX-KG中,转化大肠杆菌DE3工程菌株,IPTG诱导重组质粒pGEX-KG-MYB77在大肠杆菌DE3中表达带有GST标签的融合蛋白,超声裂解大肠杆菌,用MagneGST ProteinPurification System纯化目的蛋白,通过SDS-PAGE和Western印迹验证GST-MYB77融合蛋白的表达。结果: 重组菌株可以表达GST-MYB77融合蛋白,用Western印迹鉴定纯化的融合蛋白,在相对分子质量为55.56×103处检测到目的条带。结论: 利用大肠杆菌表达系统获得了较高纯度的GST-MYB77融合蛋白,为进一步研究津田芜菁MYB77蛋白的功能奠定了基础。