溶藻弧菌外膜蛋白OmpK的原核表达及多克隆抗体制备

编号 zgly0000980729

文献类型 期刊论文

文献题名 溶藻弧菌外膜蛋白OmpK的原核表达及多克隆抗体制备

作者 陈春琳  刘祥  俱雄 

作者单位 陕西理工学院生物科学与工程学院 

母体文献 西北农林科技大学学报;自然科学版 

年卷期 2015(7)

页码 7-14

年份 2015 

关键词 溶藻弧菌  OmpK蛋白  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 【目的】构建溶藻弧菌外膜蛋白OmpK原核表达载体,优化OmpK蛋白的诱导表达条件,制备OmpK蛋白小鼠多克隆抗体。【方法】通过PCR扩增获得ompK基因,连接pET-32a质粒构建OmpK-pET32a载体,将其转化大肠杆菌BL21后进行诱导表达。利用切胶纯化获得OmpK蛋白后,免疫小鼠制备OmpK蛋白多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体效价,Western-Blotting法检测抗血清特异性。通过正交试验,获得OmpK菌株的最佳诱导表达条件与培养条件。【结果】PCR扩增获得了长816bp的ompK基因;成功构建了OmpK-pET32a载体,其诱导表达产物分子质量为30ku,与预期结果一致。