云南松SSR-PCR反应体系的优化研究

编号 zgly0001437078

文献类型 期刊论文

文献题名 云南松SSR-PCR反应体系的优化研究

作者 蔡年辉  吕学辉  贺斌  陈诗  李根前 

作者单位 西南林业大学西南山地森林保育与利用省部共建教育部重点实验室 

母体文献 西部林业科学 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S791.257 

关键词 云南松  SSR-PCR  反应  体系  程序  优化 

文摘内容 本项研究以云南松实生苗幼嫩针叶为材料,采用单因素试验设计,分析云南松SSR-PCR扩增反应体系中各组分对扩增结果的影响,并进一步采用正交试验设计对SSR-PCR扩增反应程序进行优化。结果表明,在15μL SSR-PCR反应体系中包括,1×Taq PCR Buffer,模板DNA用量30 ng,Taq聚合酶用量1.0 U,0.2 mmol·L-1dNTPs,3.0 mmol·L-1Mg2+以及正、反引物各0.2μmol·L-1;扩增反应程序为,94℃预变性4 min;94℃变性30 s,退火30 s,72℃延伸45 s,35个循环;最后72℃延伸10 min,4℃保存。该反应条件的建立为开展云南松种质资源SSR分子标记研究提供了参考依据。