云南金花茶SSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001672148

文献类型 期刊论文

文献题名 云南金花茶SSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 李显煌  高丽云  王娟  张贵良  唐军荣  叶鹏  雷瀚  辛培尧 

作者单位 西南林业大学西南山地森林资源保育与利用教育部重点实验室  西南林业大学云南省高校林木遗传改良与繁育重点实验室  毕节市林业科学研究所  云南省大围山国家级自然保护区河口管理分局  西南林业大学国家林业和草原局西南地区生物多样性保育重点实验室 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2019年08期

年份 2019 

分类号 S685.14 

关键词 云南金花茶  SSR-PCR  体系建立  优化 

文摘内容 以云南金花茶为试验材料,利用试剂盒法、SDS法及CTAB法3种方法提取其DNA,并对3种方法的提取结果进行比较;经初筛合成云南金花茶EST-SSR引物,并对影响SSR-PCR体系的Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物及模板DNA这5个因素进行L16（45）正交实验,以期建立较为稳定的云南金花茶SSR-PCR体系。试验结果表明:试剂盒法提取得到的云南金花茶DNA质量最好且符合SSR分子标记试验。各因素对PCR扩增效果的影响程度为:Mg2+>引物> Taq DNA聚合酶> dNTP>模板DNA。试验最终确定的金花茶SSR-PCR最佳反应体系（20μL）为:2.0μL Taq Buffer、1.5μL Mg2+（25 mmol/L）、0.3μL dNTP（10 mmol/L）、0.2μL Taq DNA聚合酶（5 U/μL）、前后引物各0.4μL（10μmol/L）、0.5μL模板DNA（50 ng/μL）、14.7μL ddH2O。建立和优化云南金花茶SSR反应体系,可为云南金花茶不同种群的遗传变异研究提供基础。