新疆野苹果SSR-PCR反应体系的优化

编号 zgly0000780853

文献类型 期刊论文

文献题名 新疆野苹果SSR-PCR反应体系的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 刘遵春  苗卫东  刘大亮  陈学森 

作者单位 山东农业大学园艺科学与工程学院  河南科技学院园艺园林学院 

母体文献 广东农业科学 

年卷期 2012,39(4)

页码 97-100

年份 2012 

分类号 Q78 

关键词 新疆野苹果  SSR-PCR  优化 

文摘内容 以4个新疆野苹果株系为试材, 利用CTAB法提取DNA,对影响SSR—PCR扩增结果的主要因子设计了多梯度的优化试验。结果表明: 新疆野苹果SSR-PCR反应体系(25μL)中含ToqDNA聚合酶0-5U、模板DNA5.0ng、dNTPs0.2mmol/L、引物0.2μmol/L、Mg2+1.0mmol/L、退火温度为60%时效果最佳。最佳扩增程序为: 94℃预变性2min, 94℃变性30s, 65℃退火1min, 72~C~伸lmin, 4个循环; 94cc变性30s, 6d℃退火1min, 72℃延伸1min, 30个循环; 72%延伸5min, 4℃保存。利用此反应体系对30份新疆野苹果进行SSR-PCR扩增和电泳检测, 扩增谱带清晰且多态性较好, 表明该体系适用于新疆野苹果的基因连锁图谱构建和QTL定位。