云南松SSR—PCR反应体系的优化研究

编号 zgly0000823971

文献类型 期刊论文

文献题名 云南松SSR—PCR反应体系的优化研究

作者 蔡年辉  吕学辉  贺斌  陈诗  李根前 

作者单位 西南林业大学西南山地森林保育与利用省部共建教育部重点实验室 

母体文献 西部林业科学 

年卷期 2013(6)

页码 57-61

年份 2013 

分类号 S791.257 

关键词 云南松  SSR—PCR  反应  体系  程序  优化 

文摘内容 本项研究以云南松实生苗幼嫩针叶为材料, 采用单因素试验设计, 分析云南松SSR—PCR扩增反应体系中各组分对扩增结果的影响, 并进一步采用正交试验设计对SSR—PCR扩增反应程序进行优化。结果表明, 在15μL SSR-PCR反应体系中包括, 1×TaqPCRBuffer, 模板DNA用量30ng, Taq聚合酶用量1.0U, 0.2mmol L-1dNTPs, 3.0mmol·L-1Mg2+以及正、反引物各0.2μmol.L-1; 扩增反应程序为, 94℃预变性4min; 94℃变性30s, 退火30s, 72℃延伸45s, 35个循环; 最后72%延伸10min, 4℃保存。该反应条件的建立为开展云南松种质资源SSR分子标记研究提供了参考依据。