柞蚕核型多角体病毒实时荧光LAMP检测方法的初步建立

编号 zgly0001563547

文献类型 期刊论文

文献题名 柞蚕核型多角体病毒实时荧光LAMP检测方法的初步建立

作者 张洋  薛强  金英  李凤芹  闫伟 

作者单位 吉林省蚕业科学研究院  吉林省农业科学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2017年06期

年份 2017 

分类号 S884.51 

关键词 柞蚕核型多角体病毒  环介导等温扩增技术  引物  反应条件  早期诊断 

文摘内容 柞蚕脓病是柞蚕生产上的主要病害之一,病原为柞蚕核型多角体病毒(Ap NPV)。建立快速而准确检测蚕体样品中Ap NPV的技术,将有助于对病害的早期诊断及流行病学调查和实施有效的防控措施。以柞蚕核型多角体病毒ORF142基因为靶基因,设计2组特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,利用实时荧光PCR技术进行检测分析。结果表明,设计与合成的2组引物均能对柞蚕核型多角体病毒基因组扩增出特异性产物,其中引物组2在63℃开始孵育60 min,反应起始扩增时间为12 min,当反应时间达到40 min时,扩增曲线的最大相对荧光强度(RFU)值达6 000,相对于引物组1具有更好的及时性,可缩短一半反应起始时间。初步建立的Ap NPV实时荧光LAMP检测方法相对于传统PCR方法,检测效率提高4倍左右。