应用环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测家蚕核型多角体病毒的研究

编号 zgly0001447704

文献类型 期刊论文

文献题名 应用环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测家蚕核型多角体病毒的研究

作者 唐芬芬  杨伟克  邵榆岚  谢道燕  廖鹏飞  杨海  白兴荣 

作者单位 云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所 

母体文献 应用昆虫学报 

年卷期 2013年04期

年份 2013 

分类号 S884.5 

关键词 家蚕核型多角体病毒  环介导等温扩增技术  早期诊断  蚕业 

文摘内容 由家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopoyhedrosis virus,BmNPV)侵染家蚕Bombyx mori引起的家蚕核型多角体病(血液型脓病)在养蚕生产中发生较为普遍,对蚕业生产造成重大的经济损失。本研究建立了快捷有效的环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)用于快速检测BmNPV,为蚕业生产提供了一个有效检测BmNPV和进行早期诊断的技术。该方法是针对BmNPV的pe38基因的6个区段设计的6条引物用于扩增检测,整个反应在恒温条件63℃下进行25 min,扩增产物用电泳法和可视法检测(用SYBR Green I染色)。结果显示,LAMP检测方法的灵敏度是常规PCR方法的100倍,能检测的范围为21个拷贝。另外,用4.86×108OBs/mL感染4龄起蚕,提取血淋巴DNA为模板,PCR在感染36 h后检出病毒DNA,LAMP法能检测感染12h后的样品。