牡丹ISSR-PCR反应体系正交优化设计

编号 zgly0000476307

文献类型 期刊论文

文献题名 牡丹ISSR-PCR反应体系正交优化设计

作者 王佳  胡永红  张启翔 

作者单位 北京林业大学  上海植物园 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2006,34(24)

页码 6465-6466,6484

年份 2006 

分类号 Q946-33 

关键词 牡丹  ISSR-PcR  正交设计  反应体系 

文摘内容 以“凤丹”(Paeonia ostii)基因组DNA为模板。采用正交试验设计方法, 研究牡丹ISSR反应体系的影响因素, 建立了适合牡丹的ISSR反应体系应程序。10μl反应体系为: 1xK应缓冲液。2.5mmol/L Mg^2+, 0.4mmol/L dNTPs, 1.0U Taq聚合酶, 0.75μmol/L.引物。10-20ng模板DNA。反应程序为: 94℃预变性3min; 94℃变性45s, 45-60℃(不同引物退火温度各异)复性45s.72℃延伸90s。35个循环; 72℃延伸7min; 4℃保存。通过梯度退火试验, 确定不同引物的退火温度。