朱砂叶螨HSP90基因克隆及原核表达

编号 zgly0001371056

文献类型 期刊论文

文献题名 朱砂叶螨HSP90基因克隆及原核表达

作者 冯宏祖  刘映红  何林  李明  卢文才  薛传华 

作者单位 西南大学植物保护学院  重庆市昆虫学及害虫控制工程重点实验室  塔里木大学植物科学学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2009年08期

年份 2009 

分类号 S433.7 

关键词 朱砂叶螨  热激蛋白90  基因克隆  序列同源性分析  原核表达 

文摘内容 采用RT-PCR及RACE技术克隆朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus的热激蛋白90(HSP90)基因,并进行序列分析,得到一条长2595bp的cDNA序列,该序列开放阅读框(open reading frame,ORF)为2169bp,编码722个氨基酸,分子量约为83.45kDa,理论等电点为4.81,3′非编码区(untranslated region,UTR)为249bp,5′UTR为177bp。通过Antheprot分析发现5个HSP90家族的签名序列及胞质HSP90特征序列MEEVD。同源性分析表明,朱砂叶螨HSP90编码区核苷酸序列和其他已知的HSP90,尤其是节肢动物昆虫的HSP90,具有很高的相似性。将鉴定正确的原核重组表达质粒pET43a-TcHSP90,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(origami)进行原核表达,应用SDS-PAGE和Western blotting技术分离并检测融合蛋白,结果表明构建的原核表达质粒可以在宿主菌中稳定、正确表达。朱砂叶螨TcHSP90基因的克隆、原核表达,为进一步研究HSP90的性质和功能的研究提供有用的实验材料。