银杏ISSR-PCR扩增反应体系的建立与优化

编号 zgly0000790924

文献类型 期刊论文

文献题名 银杏ISSR-PCR扩增反应体系的建立与优化

学科分类 220.45;经济林学

作者 徐奭  张耀川  李树成  姚涛  牛振刚  陈文俐  白素兰 

作者单位 首都师范大学生命科学学院  北京农业职业学院园艺系 

母体文献 生物技术通讯 

年卷期 2012,23(1)

页码 80-85

年份 2012 

分类号 Q78 

关键词 银杏  ISSR-PCR  反应体系优化 

文摘内容 目的: 为了对银杏进行分子鉴定和遗传关系的分析,建立银杏ISSR-PCR的最佳扩增反应体系。方法: 采用正交设计和单因素梯度实验,对影响ISSR-PCR反应体系的5个主要因素(Mg2+、dNTP、引物、模板DNA及Taq DNA聚合酶)进行筛选及优化。结果: 银杏25μL ISSR最佳扩增反应体系包含10×Taq反应缓冲液、2.5 mmol/L MgCl2、0.45 mmol/L dNTP、1.2μmol/L引物(UBC861)、10 ng模板DNA及0.9 U Taq DNA聚合酶,使用此ISSR扩增反应体系,获得了10株不同性别银杏DNA的清晰条带,验证了该体系的稳定性。结论: 优化的反应体系为采用ISSR分子标记技术对银杏进行遗传多样性分析、遗传育种和转基因等研究奠定了一定的理论基础。