博白大果油茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000718186

文献类型 期刊论文

文献题名 博白大果油茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化

学科分类 220.45;经济林学

作者 范海艳  曹福祥  彭继庆  龙绛雪  邓明  司书斌 

作者单位 中南林业科技大学 

母体文献 中南林业科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2011,31(4)

页码 97-103

年份 2011 

分类号 S794.4 

关键词 博白大果油茶  单因素设计  ISSR-PCR  反应体系优化 

文摘内容 以博白大果油茶Camellia gigantocarpa Hu et Huang为材料,通过单因素实验设计和正交设计L18(35)对影响PCR反应体系的主要成分及PCR扩增程序进行优化。建立了稳定的、可重复的博白大果油茶ISSR-PCR扩增反应体系。在20μL的反应体系中,Mg2+浓度为2.5mmol/L,模板DNA用量为20ng,Taq DNA聚合酶为1.75U,dNTPs浓度为0.25mmol/L,引物浓度为0.6mmol/L。反应程序为: 94℃预变性4min,94℃变性30s,50℃退火45s,72℃延伸90s,35个循环,72℃延伸7min,4℃保存。