菊花SRAP-PCR反应体系的优化与确立

编号 zgly0001579620

文献类型 期刊论文

文献题名 菊花SRAP-PCR反应体系的优化与确立

作者 张飞  陈发棣  房伟民  李风童  刘浦生 

作者单位 南京农业大学园艺学院 

母体文献 植物资源与环境学报 

年卷期 2009年03期

年份 2009 

分类号 S682.11 

关键词 菊花  SRAP-PCR  正交实验设计  反应体系优化 

文摘内容 采用L16(45)正交实验设计,对SRAP-PCR反应体系中Mg2+、dNTPs和引物浓度以及TaqDNA聚合酶和模板DNA用量等5个因素进行了优化,并确立了适合菊花〔Dendranthema×grandiflorum (Ramat.) Kitamura〕SRAP-PCR的反应体系。菊花的SRAP-PCR最佳反应体系为:反应体系总体积20μL,含3.125 mmol.L-1Mg2+、187.5μmol.L-1dNTPs、10.0μmol.L-1引物、50 ng模板DNA、0.5 UTaqDNA聚合酶及1×PCR buffer。各因素对菊花基因组DNA SRAP-PCR扩增结果的影响程度不同,其中dNTPs浓度影响最大,TaqDNA聚合酶用量的影响最小。运用菊花品种‘奥运含笑’和‘雨花落英’及二者的F1杂交后代单株的基因组DNA对优化的SRAP-PCR反应体系进行验证,均获得了多态性丰富、条带清晰的扩增图谱,表明所确立的菊花SRAP-PCR反应体系稳定可靠。