蜡梅花瓣基因组DNA提取及RAPD-PCR反应体系优化

编号 zgly0000693745

文献类型 期刊论文

文献题名 蜡梅花瓣基因组DNA提取及RAPD-PCR反应体系优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 叶丽娟  禄久幸  杨秋生 

作者单位 河南农业大学林学院 

母体文献 山西农业科学 

年卷期 2011,39(4)

页码 299-303

年份 2011 

分类号 S685.17 

关键词 蜡梅  DNA提取  RAPD  体系优化 

文摘内容 以蜡梅花瓣为试材,用改良CTAB法提取基因组DNA,并设置不同浓度梯度对每个PCR反应因子进行相应试验,结果表明,改良CTAB法提取蜡梅花瓣基因组纯度高、质量好。并采用正交试验设计的方法,对蜡梅RAPD-PCR条件进行了优化,结果表明,最佳的蜡梅RAPD-PCR反应体系(20μL)为: 1×buffer,1.0 U TaqDNA聚合酶,2.0 mmol/L MgCl2,0.15 mmol/L dNTPs,0.5μmol/L引物和模板DNA 30～40 ng;适宜的扩增条件为: 94℃预变性3 min;94℃变性30 s,38℃退火30 s,72℃延伸90 s,38个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。