H5亚型AIV HA抗原表位重组蛋白McAbs的制备及应用

编号 zgly0001423585

文献类型 期刊论文

文献题名 H5亚型AIV HA抗原表位重组蛋白McAbs的制备及应用

作者 庞耀珊  谢芝勋  邓显文  谢志勤  谢丽基  刘加波  范晴 

作者单位 广西壮族自治区兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2012年10期

年份 2012 

分类号 S852.659.5 

关键词 禽流感病毒(AIV)  H5N1亚型  抗原表位  单克隆抗体(McAbs) 

文摘内容 目的以H5亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的血凝素(HA)抗原表位重组表达蛋白为抗原,探索H5亚型AIV单克隆抗体制备的简便有效途径。方法利用H5亚型AIV的HA抗原表位原核表达重组蛋白为抗原,4次免疫8～10周龄雌性BALB/c小鼠后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA方法筛选能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体的特性及初步应用价值进行测试。结果得到一株能稳定分泌针对H5亚型AIVHA抗原表位的特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株,单克隆抗体ELISA效价达1:5×104,为具有IgK轻链的IgM亚类。该单克隆抗体能特异性地与H5亚型AIV产生肉眼可见的WesternBlot免疫印迹反应,与其它供试的禽病抗原无反应。H5N1亚型AIV阳性血清能有效阻断辣根过氧化酶标记的单克隆抗体与HA抗原表位重组蛋白的结合。结论本研究探索出一条利用H5亚型AIV的HA抗原表位重组表达蛋白为抗原的单克隆抗体制备的简便、高效途径,所制备的单克隆抗体稳定性好、效价高、特异性强,在H5亚型禽流感病毒及其血清学检测中有较高的应用价值。