富含多糖的转基因石斛基因组DNA提取方法

编号 zgly0000635213

文献类型 期刊论文

文献题名 富含多糖的转基因石斛基因组DNA提取方法

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张妙彬  潘丽晶  范干群  陈继敏  程萍 

作者单位 珠海市农业科学研究中心 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2009,7(1)

页码 209-214

年份 2009 

分类号 S792.14  Q959.212.06 

关键词 石斛兰  DNA提取  多糖  PCR  Southern杂交 

文摘内容 在石斛兰转基因研究中，需通过PCR和Southern杂交等手段检测外源基因是否转入并整合到转化植株基因组。由于转化石斛植株生长缓慢，且含有多糖，因此从转化植株中提取高质量的基因组DNA以尽快对转基因苗进行分子检测存在较大困难。本研究旨在通过改良现有的DNA提取法（CTAB法或SDS法），克服转化石斛植株基因组DNA提取中碰到的产量低，纯度不高而导致难以进行PCR或酶切等问题。在本研究所用的3种改良法中，方法Ⅱ能从少量的转化石斛苗中提取出高产量和高纯度的基因组DNA。研究结果表明方法Ⅱ提取的基因组DNA完全适用于转基因石斛的外源基因PCR扩增，限制性酶切和Southern杂交分析。