农杆菌介导石斛兰遗传转化的研究

编号 zgly0001338092

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导石斛兰遗传转化的研究

作者 张妙彬  梁擎中  肖浩  岑鹏  范干群  潘丽晶 

作者单位 珠海市农业科学研究中心  珠海市农业科学研究中心 广东珠海519070  广东珠海519070 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2008年04期

年份 2008 

分类号 S682.31 

关键词 石斛兰  GUS  根癌农杆菌  转化  Southern杂交 

文摘内容 利用根癌农杆菌介导转化石斛兰类原球茎(PLBs),研究了石斛兰对潮霉素的敏感性,并通过gus瞬时表达率比较不同类型农杆菌、侵染液浓度及乙酰丁香酮(AS)等对石斛兰转化的影响。结果表明:带有pCAMBIA1301的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105(简称为E1301)比带有相同表达载体的LBA4404(简称L1301)对石斛兰的转化效率更高,前者约为后者的6倍;较高浓度的侵染液转化效率更高(OD600为1.0或1.2时的转化效率约为OD600为0.6或0.8时的2倍);在农杆菌生长至OD600值为0.8时,添加AS可提高转化效率;而当OD600为0.6、1.0和1.2时,添加AS反而不同程度地降低转化效率;在各种处理中,OD600为1.0时不添加AS的转化效率最高,达44.4%。经过5~6个月选择培养,抗性小苗经GUS染色、PCR和Southern杂交检测证明为转基因植株。