根癌农杆菌介导的葡萄风信子遗传转化体系

编号 zgly0001569366

文献类型 期刊论文

文献题名 根癌农杆菌介导的葡萄风信子遗传转化体系

作者 张海芹  刘雅莉  张锋  刘爱玲 

作者单位 西北农林科技大学风景园林艺术学院  西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室/农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室  西北农林科技大学林学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2017年02期

年份 2017 

分类号 S682.29 

关键词 葡萄风信子  根癌农杆菌  GUS  遗传转化  超声波 

文摘内容 【目的】以葡萄风信子亚美尼亚(Muscari armeniacum)的胚性愈伤组织为受体系统,建立高效稳定的葡萄风信子遗传转化体系,为葡萄风信子遗传改良及相关基因功能的研究奠定基础。【方法】通过GUS(β-葡萄糖苷酸酶)瞬时表达率,研究根癌农杆菌的菌液浓度、侵染时间、共培养时间和超声波预处理时间等4个因素对葡萄风信子GUS瞬时表达效率的影响,并在最佳条件下将GUS基因转入葡萄风信子,获得稳定表达转化植株。【结果】葡萄风信子胚性愈伤组织GUS染色结果表明,随着根癌农杆菌菌液浓度的增加及侵染时间、共培养时间和超声波预处理时间的延长,GUS瞬时表达效率均呈现先增后降趋势;当根癌农杆菌菌液OD600为0.5、侵染时间20min、共培养4d、80W功率超声波预处理3min时,其GUS瞬时表达效率最高,分别为14.43%,13.73%,10.85%和75.36%;在最佳转化体系下将GUS基因转入葡萄风信子,获得207株潮霉素抗性植株。GUS组织化学检测结果表明:在抗性植株的不同部位都呈现不同程度的蓝色,PCR检测有7株为阳性植株,阳性率为7%;反转录PCR检测显示,7株阳性植株中有3株扩增出GUS基因目的条带。【结论】初步建立了根癌农杆菌介导的葡萄风信子遗传转化体系,该体系能显著提高葡萄风信子GUS瞬时表达效率。