3种猪繁殖障碍性病毒Real-time PCR快速检测方法的建立

编号 zgly0000807373

文献类型 期刊论文

文献题名 3种猪繁殖障碍性病毒Real-time PCR快速检测方法的建立

作者 赵绪永  马辉  宁豫昌  赵丽 

作者单位 郑州牧业工程高等专科学校 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(12)

页码 27-33

年份 2012 

分类号 S858.284.43 

关键词 猪伪狂犬病毒  猪细小病毒  猪圆环病毒Ⅱ型  多重实时荧光定量PCR 

文摘内容 【目的】:建立可同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的多重实时荧光定量PCR方法。【方法】:根据GenBank数据库中PRV、PPV和PCV2的核苷酸序列,设计3对特异性引物和探针,以10倍系列稀释的阳性质粒为模板,优化反应条件,建立检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,并对其敏感性、重复性和特异性进行检验;分别采用单项和多重Real-time PCR方法,对临床收集的42份疑似病料进行检测,比较2种方法的符合率。【结果】:特异性和灵敏度试验表明,建立的多重Real-time PCR检测方法具有高度特异性,与其他病原无明显交叉反应;检测灵敏度高,可检出1.0×101拷贝/μL的阳性质粒或1TCID50/mL的病毒样品。用多重Real-time PCR对42份临床疑似病料进行检测,其检测结果与单重Real-time PCR结果完全一致,表明多重Real-time PCR方法是可行的。【结论】:建立了可同时检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,该法具有快速、灵敏、特异和重复性好等优点。