多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立

编号 zgly0001487674

文献类型 期刊论文

文献题名 多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立

作者 温青娜  周玲玲  申红  杨菊凤  林祥群 

作者单位 河南科技学院  广东中大南海海洋生物技术工程中心有限公司  石河子大学  山东畜牧兽医职业学院  石河子职业技术师范学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S852.651 

关键词 欧洲型  美洲型  高致病性  猪繁殖与呼吸综合征病毒  多重实时荧光定量PCR 

文摘内容 根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。