聚糖内切酶EGⅢ的克隆及其在酵母中的表达（摘要）

编号 zgly0000620293

文献类型 期刊论文

文献题名 聚糖内切酶EGⅢ的克隆及其在酵母中的表达（摘要）

作者 国震宇  王丕武  曲靖  付永平  姚丹  付玉芹 

作者单位 吉林农业大学农学院 

母体文献 农业科学与技术：英文版 

年卷期 2009,10(6)

页码 47-49,52

年份 2009 

分类号 Q782  TS749.7 

关键词 绿色木霉  葡聚糖内切酶Ⅲ  大肠杆菌  转化  酶活力 

文摘内容 [目的]构建可降解纤维类固体废弃物的工程菌。[方法]采用RT-PCR方法克隆了绿色木霉（Trichoderma viride）AS313711的葡聚糖内切酶Ⅲ（EGⅢ）的cDNA,测序后构建到酵母表达载体pESP-2上,并通过电击法将其转到酵母感受态细胞中去,得到酵母表达转化子。通过DNS法测定该转化子在不同温度、不同pH值下酶活力的大小。[结果]EGⅢ的cDNA开放阅读框长度为1 257 bp,编码418个氨基酸,推测蛋白质分子量为44.1×10~3。在pH值为4.9、温度在60℃条件下,EGⅢ酶活力最高,相对酶活为100%。[结论]获得了高表达效率的EGⅢ-T-pESP-2酵母表达载体,其表达活性要比天然的酶高出3～5倍,只要调节好温度、pH值的关系,可提高纤维素葡聚糖内切酶的下游转化纤维素效率,在大规模生产中生产出大量的葡萄糖。