齿肋赤藓中半定量RT-PCR方法的探讨

编号 zgly0000653526

文献类型 期刊论文

文献题名 齿肋赤藓中半定量RT-PCR方法的探讨

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 杨红兰  张道远  马瑞  刘燕 

作者单位 中国科学院干旱区生物地理与生物资源重点实验室  中南林业科技大学生命科学学院 

母体文献 生物技术 

年卷期 2010,20(2)

页码 23-25

年份 2010 

分类号 Q789 

关键词 齿肋赤藓  半定量RT-PCR  18SrRNA  内参基因 

文摘内容 目的: 建立一种半定量RT-PCR方法,用于齿肋赤藓(Syntrichia caninervis)基因表达研究。方法: 比较常用的几种内参照基因actin、tubulin及18S rRNA在齿肋赤藓中的表达情况,以确定表达稳定的内参基因;分析PCR扩增动力学,确定内参和靶基因的PCR体系。结果: 琼脂糖凝胶电泳检测分析表明: 18S rRNA作为齿肋赤藓的内参基因更稳定;同管扩增试验表明: 18SrRNA的引物滞后6个循环加入PCR扩增体系中,至第26个循环,二者同时处于指数扩增期,且靶基因RT-A的扩增效率不受影响。结论: 18S rRNA与RT-A可以同管扩增,18S rRNA可以作为半定量RT-PCR的内参照,为齿肋赤藓基因表达研究奠定基础。