二化螟APN1的原核表达及其与Cry2Aa蛋白的结合特性研究

编号 zgly0001659380

文献类型 期刊论文

文献题名 二化螟APN1的原核表达及其与Cry2Aa蛋白的结合特性研究

作者 刘慧  李博  牛林  邱林  王永 

作者单位 湖北工程学院生命科学技术学院/特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室  华中农业大学植物科学技术学院/昆虫资源利用与害虫可持续治理湖北省重点实验室  广州海关隶属南沙海关  中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室  湖南农业大学植物保护学院 

母体文献 生物安全学报 

年卷期 2018年04期

年份 2018 

分类号 S435.112.1 

关键词 Cry2Aa  二化螟  APN1  原核表达  结合能力 

文摘内容 【目的】Bt杀虫蛋白发挥杀虫活性的重要前提是Cry蛋白能够与昆虫中肠上皮细胞刷状缘膜囊(BBMVs)上的受体蛋白结合。在前期获得二化螟氨肽酶N1(Aminopeptidase N,APN1)基因全长序列的基础上,明确二化螟APN1多肽片段与Cry2Aa的结合能力。【方法】将二化螟APN1序列片段在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,利用蛋白质单向电泳和ligand blotting技术分析二化螟APN1多肽片段与Cry2Aa的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21(DE3)中表达一个约70 ku的蛋白,纯化后的多肽条带单一,纯度较好。Ligand blot分析结果显示,表达的二化螟APN1多肽片段可以与活化的Cry2Aa杀虫蛋白结合,且结合条带随着重组蛋白上样量的降低而减弱。【结论】APN1多肽片段可以与Cry2Aa结合,为阐明APN1基因的功能奠定基础,也为其他Bt蛋白的受体蛋白相关研究提供新的借鉴。