菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用

编号 zgly0001476166

文献类型 期刊论文

文献题名 菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用

作者 胡加谊  罗志文  李向宏  范鸿雁  周朋  章绍延  张治礼  刘志昕  何凡 

作者单位 海南省农业科学院热带果树研究所/农业部海口热带果树科学观测实验站  海南省农垦科学院  中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室 

母体文献 植物保护 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S436.68 

关键词 菠萝凋萎相关病毒-1  TaqMan探针  实时荧光定量RT-PCR  检测 

文摘内容 菠萝凋萎相关病毒-1(Pineapple mealybug wilt associated virus-1,PMWaV-1)是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物,建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为y=-3.307×log x+38.18,相关系数r2为0.998。试验结果表明,该方法能特异性地检测PMWaV-1,对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应;最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1.98%,是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。