家蚕Poly(A)结合蛋白基因BmPABP的克隆及序列与功能分析

编号 zgly0001410148

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕Poly(A)结合蛋白基因BmPABP的克隆及序列与功能分析

作者 徐汉福  王峰  王根洪  段晓利  马三垣  夏庆友 

作者单位 农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室西南大学蚕学与系统生物学研究所  重庆大学农学及生命科学研究院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2011年03期

年份 2011 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  Poly(A)结合蛋白  基因克隆  序列结构  细胞转染  功能 

文摘内容 Poly(A)结合蛋白[Poly(A)-binding protein,PABP]是广泛存在于真核生物细胞内的一类高保守性蛋白,通过与Poly(A)的结合形成翻译起始复合物调节mRNA的稳定性和翻译效率。利用RT-PCR方法克隆了家蚕Poly(A)结合蛋白基因Bm-PABP,该基因含有4个外显子,开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为1 812 bp,编码603个氨基酸,具有4个典型的RNA识别模体(RNA recognization motif,RRM)和1个保守的C末端结构域。基因芯片数据分析显示,BmPABP在家蚕5龄第3天幼虫各组织以及5龄第4天至化蛾阶段具有高水平的转录表达。构建基于家蚕Actin4启动子的瞬时转染载体pSLA4-Bm-PABP,将其与携带有荧光素酶报告基因的pSLA4-LUC质粒分别按1∶1和2∶1的摩尔比混合后共转染昆虫Sf9细胞,于转染后72 h检测荧光素酶活性,结果显示荧光素酶的活性较对照分别提高了11.9倍和7.5倍。研究结果初步证实了BmPABP具有促进目的基因表达的功能,同时提示利用BmPABP有望提高外源基因在转基因家蚕中的表达水平,可应用于家蚕生物反应器研究。