阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系研究

编号 zgly0001339076

文献类型 期刊论文

文献题名 阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系研究

作者 潘敏慧  刘敏  刘佳  杜娟  张春东  鲁成 

作者单位 西南大学农业部蚕桑学重点开放实验室  云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2008年04期

年份 2008 

分类号 S881 

关键词 家蚕  阳离子脂质体  细胞转染  转基因细胞系 

文摘内容 阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU2、BmN和草地贪夜蛾卵巢细胞Sf21进行了外源DNA质量、脂质体用量、转染细胞密度和转染孵育时间等4个转染条件的优化实验,筛选到了阳离子脂质体转染效率最高的细胞系BmN-SWU1。BmN-SWU1细胞的最佳转染条件为:外源DNA0.6μg,脂质体2.5μL,细胞密度1×105mL-1,无血清条件下孵育24 h。此条件下转染效率可达55.08%。用抗生素G418筛选转染后的BmN-SWU1细胞,建立了GFP转基因细胞系。