马动脉炎病毒N蛋白基因GST融合表达载体的构建及表达

编号 zgly0001299975

文献类型 期刊论文

文献题名 马动脉炎病毒N蛋白基因GST融合表达载体的构建及表达

作者 杜建  王志亮  宋厚辉  金宁一  张念祖 

作者单位 农业部动物检疫所  中国科学院微生物研究所  军事医学科学院第十一研究所  农业部热带亚热带动物病毒学重点实验室 山东青岛266032  昆明市畜牧兽医站  云南昆明650223  山东青岛266032  北京100088  吉林长春130062  云南昆明650224 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2005年09期

年份 2005 

分类号 S852.652 

关键词 马动脉炎病毒  核衣壳蛋白基因  克隆  原核表达 

文摘内容 采用RT-PCR方法扩增出马动脉炎病毒核衣壳蛋白基因ORF7,并将其克隆到pMD18-T载体,构建成重组质粒pMD18-N,在上海生物工程公司测序。结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与EAV NC-002532株的同源性为99%。表明ORF7是EAV基因组内的保守序列,将ORF7亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建成重组质粒pGEX-6P-N,用pGEX-6P-N转化表达菌株BL21(DE3),诱导表达后SDS-PAGE和Western blotting分析表明,克隆在谷胱苷肽硫转移酶(GST)下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子质量约为40 ku,为马动脉炎病毒病血清学诊断方法的建立奠定了基础。