犬腺病毒Ⅰ型和Ⅱ型Taq Man双重荧光定量PCR方法的建立

编号 zgly0001690823

文献类型 期刊论文

文献题名 犬腺病毒Ⅰ型和Ⅱ型Taq Man双重荧光定量PCR方法的建立

作者 巨敏莹  王艳杰  刘东霞  张斌  韩宇  乌吉斯古楞  宋庆庆  关平原 

作者单位 内蒙古农业大学兽医学院  金宇保灵生物药品有限公司兽用疫苗国家工程实验室 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2019年11期

年份 2019 

分类号 S858.292 

关键词 犬腺病毒Ⅰ型  犬腺病毒Ⅱ型  TaqMan荧光定量PCR  检测方法 

文摘内容 为鉴别检测犬腺病毒(CAV)Ⅰ型和Ⅱ型,根据GenBank中CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ型参考基因序列,设计合成1对通用引物和2条鉴别探针,建立了可鉴别检测CAV-Ⅰ型和CAV-Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法。同时,对该方法进行了优化,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验,并与普通PCR检测方法进行样品检测符合率分析。特异性试验结果显示;本研究建立方法对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬冠状病毒均未产生扩增曲线。敏感性试验结果显示,建立方法对CAV-Ⅰ的检测敏感度为100 copies/μL,对CAV-Ⅱ的检测敏感度为10 copies/μL。重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于5%。临床样品检测对比结果显示,建立方法与普通PCR方法的符合率为95.12%。结果表明,本研究建立的Taq Man双重荧光定量PCR方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,可用于临床鉴别检测CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ型。本研究为CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ型感染的检测、鉴别以及流行病学调查提供了便捷快速的方法。