里氏木霉木聚糖酶XYNⅡ基因在毕赤酵母中的分泌表达

编号 zgly0000510557

文献类型 期刊论文

文献题名 里氏木霉木聚糖酶XYNⅡ基因在毕赤酵母中的分泌表达

作者 欧阳嘉  王向明  张清  严明  许琳 

作者单位 南京林业大学化学工程学院  南京工业大学制药与生命科学学院 

母体文献 林产化学与工业 

年卷期 2007,27(5)

页码 83-88

年份 2007 

分类号 TQ91  Q786 

关键词 里氏木霉  木聚糖酶  毕赤酵母  分泌表达 

文摘内容 采用RT—PCR方法克隆到里氏木霉RutC-30木聚糖酶(XYNⅡ)的cDNA序列。测序结果表明，XYNⅡ的cDNA基因开放阅读框长度为669bp，编码223个氨基酸，N端1～19个氨基酸为潜在的信号肽序列，删去潜在信号肽序列，将里氏木霉木聚糖酶的基因(xynⅡ)构建到巴斯德毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K上，线性化后电击转化到巴斯德毕赤酵母中，经G418筛选和PCR鉴定后的转化子用1％的甲醇进行诱导，对重组木聚糖酶活检测显示该基因能在毕赤酵母中表达有生物活性的XYNⅡ并分泌到胞外。发酵液中的酶活在诱导培养60h达到1．45IU／mL，最适酶解温度为50℃，最适pH值为6．0。