苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性

编号 zgly0001659578

文献类型 期刊论文

文献题名 苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性

作者 崔婷婷  杜立新  彭琦  张杰  高继国  宋福平 

作者单位 东北农业大学生命科学学院  中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室  河北省农林科学院植物保护研究所 

母体文献 植物保护 

年卷期 2019年01期

年份 2019 

分类号 S476 

关键词 苏云金芽胞杆菌  cry基因启动子  转录活性  Cry晶体蛋白  晶体蛋白表达 

文摘内容 本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E。分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性。本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件。